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3D表皮模型完整性功能評價需要注意什么

更新時間:2020-04-09 瀏覽次數(shù):3233次

   在日本香妝品協(xié)會推薦的長期給藥(安全性)研究的劑量確定方法指南Dose Setting Method Guideline for Human Long-Duration Trials (Safety)進行透皮擴散試驗和化妝品3D表皮模型體外功效評價時,建議以目視、電阻抗值electrical resistance,ER)和經(jīng)皮水分流失量( TEWL )等為指標,進行皮膚模型的完整性評價(integrity test),使用合適的皮膚模型樣品對試驗結(jié)果的準確性非常重要。首先實驗皮膚膜需要進行解凍及水合處理,解凍以室溫15分鐘左右為標準進行。 皮膚膜的水合處理:在擴散池中夾入皮膚膜的狀態(tài)下,在擴散池的一側(cè)(表皮側(cè))加入生理鹽水溶液(或者等滲磷酸緩沖液),使其浸泡30分鐘~1小時左右。 解凍及水合處理后剩余的水分附著在皮膚上時,用濾紙或棉棒等移去。 為了不損傷皮膚,整個過程請小心操作。

   測量皮膚模型電阻抗的方法是將0.9%生理鹽水溶液(或等滲磷酸鹽緩沖液)加入到水合好的皮膚模型中,在擴散池的一側(cè)(表皮),測量電阻抗(ER)。測定結(jié)束后,用棉棒等仔細擦拭擴散池和皮膚表面殘留的水分,需要小心操作,以免損傷皮膚。另一方面,由于皮膚水合對TEWL值測定影響很大,為了獲得穩(wěn)定的測量值,將皮膚固定在擴散單元中,在放入受體液后,在水合之前測量比較好。在完整性測試(integrity test)中顯示異常的皮膚模型或細胞不用于后續(xù)評估測試。

   參照皮膚完整性測試數(shù)據(jù)進行分樣,在透皮擴散試驗和功效評估前,應參照測得的電阻抗值對試樣進行分配,這樣可以防止因皮膚模型間的偏差帶來的數(shù)據(jù)結(jié)果的差異性。

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